Devido a procura por alternativas sustentáveis para o controle de pragas e doenças na agricultura, o emprego das bactérias do gênero Bacillus tem sido efetivo para o controle biológico, sendo o Bacillus thuringiensis (Bt) a bactéria mais utilizada, devido a sua capacidade de atuação como biopesticida. Atualmente, existem cerca de 25 formulações comerciais a base de Bt no mercado, porém os meios de cultura ainda são os grandes responsáveis pelo alto custo da produção destes bioinsumos. Através da esporulação das bactérias Bt, avaliou-se um meio de cultura (ML) composto por melaço e extrato de levedura como uma alternativa para o meio a base de ágar nutriente proposto pela EMBRAPA. O meio avaliado foi efetivo para o crescimento e esporulação de Bt sendo a contagem de esporos contagem de esporos ter sido superior a 10⁹ UFC/mL após 48 h, resultado similar ao reportado em meios formulados com mais elementos.